產(chǎn)品名稱(chēng):表皮生長(cháng)因子受體(EGFR)ELISA試劑盒
產(chǎn)品規格:48T/96T
產(chǎn)品貨號:LE-H4000
免費咨詢(xún):0551-66107970
本試劑盒僅限于科研使用,請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。
嚴格按照實(shí)驗說(shuō)明書(shū)操作,并佩戴一次性手套和口罩。
以下文字為產(chǎn)品簡(jiǎn)介,詳情以說(shuō)明書(shū)為準,可QQ或聯(lián)系在線(xiàn)客服索取。
訂購方式:
陳經(jīng)理 電話(huà):15375214453(微信同號) Q Q:737388448
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被抗體的微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長(cháng)下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
樣品收集及處理方式
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑盒規格及配置
名稱(chēng) |
96孔配置 |
48孔配置 |
微孔酶標板 |
12孔×8條 |
12孔×4條 |
標準品 |
0.3mL*6管 |
0.3mL*6管 |
樣本稀釋液 |
6mL |
3mL |
檢測抗體-HRP |
10mL |
5mL |
20×洗滌緩沖液 |
25mL |
15mL |
底物A |
6mL |
3mL |
底物B |
6mL |
3mL |
終止液 |
6mL |
3mL |
封板膜 |
2張 |
2張 |
說(shuō)明書(shū) |
1份 |
1份 |
自封袋 |
1個(gè) |
1個(gè) |
自備儀器
1. 酶標儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用
洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。
結果計算
繪制標準曲線(xiàn):在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線(xiàn)性回歸曲線(xiàn),按曲線(xiàn)方程計算各樣本濃度值。
相關(guān)新聞: |
0551-66107970
地址:合肥市包河經(jīng)濟開(kāi)發(fā)區花園大道17號合肥市雙鳳經(jīng)濟開(kāi)發(fā)區金珠路合肥萊爾生物科技有限公司2樓1515室版權所有 © 合肥萊爾生物科技有限公司 皖I(lǐng)CP備17006278號-2